1.分子生物学和基因工程领域:
诱导基因表达:IPTG 可以特异性地与阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白构象发生变化,从而从操纵基因上解离,解除对启动子的抑制,启动下游目的基因的转录和翻译,实现目标蛋白的表达。例如在大肠杆菌中表达外源基因时,将目标基因置于 lac 启动子的控制之下,通过添加 IPTG 来诱导目标基因的表达。
蓝白斑筛选:IPTG 常与 X-gal 等试剂结合使用,用于重组细菌菌落的蓝白筛选。在含有 IPTG 和 X-gal 的培养基上,能够诱导表达 β- 半乳糖苷酶的菌落会呈现蓝色,而不能表达的菌落则呈现白色,有助于快速识别含有目标基因的重组菌落。
2.蛋白质研究领域
蛋白质表达与纯化:IPTG 可诱导细胞大量产生目标蛋白质,从而使研究人员更容易分离和纯化这些蛋白质。在融合蛋白表达系统中,IPTG 可以诱导融合蛋白的表达,然后通过亲和层析等方法进行纯化。
研究蛋白质功能和相互作用:通过 IPTG 诱导表达的蛋白质可以用于研究蛋白质在细胞内的作用、与其他分子的相互作用以及在疾病中的角色等。还可以在两个蛋白质之间克隆 lacZ,使两蛋白的相互作用可导致 lacZ 表达,将重组质粒转入大肠杆菌,在不同条件下用 IPTG 诱导并经 Blue-Gal 染色,通过观察蓝斑的形成与消失,判断两蛋白的相互作用与结合情况。
3.药物研发领域
药物筛选:IPTG 可以用于筛选能够抑制 β- 半乳糖苷酶活性的药物,从而发现新的药物靶点。
研究基因表达和调控机制:在研究与治疗相关基因的表达和调控机制方面发挥作用,帮助科研人员了解疾病相关基因的表达调控规律,为开发新的治疗方法和药物提供理论基础。